葉片垂軟
一株病株上都有一片黃化、萎凋特別嚴重的葉片,
推斷是病源入侵處。
而且從葉片上由葉緣向內的三角形痕跡,
顯示病原可能是從葉片的水孔入侵。
我們在上星期並沒有看到任何類似的病徵,這種疾病似乎發展得非常迅速。
莖中央通常都有一段部位軟腐,散發惡臭。
莖中央通常都有一段部位軟腐,散發惡臭。
在田間時,吳大哥表示認為是蔓割病。
為了不讓疾病傳染,吳大哥把生病的瓜連根拔除。
我們藉機拿了兩株病瓜回學校,打算趁實習課時鏡檢拍照上傳。
但是看了我們帶回去的軟腐瓜藤,
實習課的助教眉頭一皺,發覺病情並不單純
因為蔓割病通常是不會有軟腐現象的。更不會有如此明顯的惡臭。
我們三人都摸不著頭緒,就帶著病株和照片去詢問了教授。
:病情發展迅速,葉片似乎有稍微的透化,基於這些特徵判斷可能是疫病。
為了確認是否是疫病,我們倆人去找植病系真菌室的陳啟予教授,
看了我們的病株:
「疫病再嚴重,也很少造成如此嚴重的軟腐、惡臭。」
「不過,還是先做病源分離試試看吧。」
教授把我們指派給尹則學長
給我們做病源分離、培養的器材還有各種技術指導
由於判斷可能是疫病,我們進行植株表面消毒後,取出裡頭的組織,進行培養
利用water agar培養基來培養
但日後,培養皿內並沒有長出疫病類的菌。
因此我們排除了疫病感染的可能性
後來又徵詢幾位教授的意見,
認為惡臭的病徵,更類似細菌性的病原感染
細菌性的感染有一種簡單的檢測方式
就是觀察菌流/菌泥(ooze):
把感染的植物莖部切開,剖面泡於水中
可以觀察到雲狀的菌流流出
(我們試了十幾分鐘,切了好多段病株再加上手指擠壓才好不容易成功呢)
「可能是Erwinia屬的細菌造成的。」──黃振文教授如是說。
於是乎,為了確認此判斷是否正確,
接下來要進行細菌性的分離培養。
我們配製了牛肉培養基,進行畫盤分離。
幾天過後....
趕快用顯微鏡檢查看看
天哪!!!!!
培養皿長~蛆~啦~~~~~
由於是牛肉培養基,
裡面有真的牛肉粹取物,很容易吸引果蠅孳生
(後來我們又做了一次培養,把培養皿用para film包起來
可是三盤當中竟然還是有一盤長蛆,十分誇張。)
不論如何,小心挑選沒有被蛆爬過的菌落,
又做了一次的畫盤分離培養。
接著,我們又使用了另一種培養基──CVP培養基
將再NA培養基純化過的菌(左),點入CVP培養基(右)測定是否為Erwinia屬
取培養出來的待測菌,
還有Erwinia的標準菌株,
交互和點在培養皿上。
等待了數日,結果......
超感動啦!!!
培養皿上標是1與2的分別是由兩盤培養基中挑出來的代測菌株,
0則是標準菌株。
由於培養出來的菌落形態基本上一致(圓形乳白色,中央呈現淡紅色,周圍圓形凹陷。)
於是,經歷了3個多星期的追查
總算可以斷定
病害是由Erwinia屬造成。
全案終結!
從5月5日第一次發現病害,一直最後的八個原型菌落出現已經是5月26日。
這三個星期我們每兩三日就往實驗室跑去進行分離培養,
辛苦過後得出漂亮的結果、終於可以宣判結案簡直令人喜極而泣阿!
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